在精神分裂癥治療中，抗精神病藥物氨磺必利的血藥濃度監(jiān)測(cè)至關(guān)重要。依利特科技開發(fā)出一種基于集成化多柱二維液相色譜系統(tǒng)（2D-LC）的新方法，僅需12分鐘即可完成血清中氨磺必利的檢測(cè)。這一成果發(fā)表在《色譜》期刊上，為血藥濃度監(jiān)測(cè)提供了更優(yōu)選擇。

一、傳統(tǒng)檢測(cè)方法的“痛點(diǎn)”在哪里？

氨磺必利是第二代抗精神病藥物，其有效治療濃度范圍在100~320 ng/mL之間。濃度不足會(huì)導(dǎo)致療效不佳，濃度過(guò)高則可能引發(fā)嚴(yán)重副作用。常用檢測(cè)方法面臨如下難題：

1、血清中的被測(cè)藥物組分的濃度處于ng/mL級(jí)別，需要高靈敏度檢測(cè)技術(shù)。

2、血清中成分多樣，樣品前處理復(fù)雜，傳統(tǒng)前處理方法需通過(guò)液液萃取或固相萃取等步驟凈化樣品，還要經(jīng)過(guò)氮吹、復(fù)溶等操作，不僅耗時(shí)（單次分析常超過(guò) 30 分鐘），還易導(dǎo)致樣品損失。

3、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）雖靈敏度高，但儀器價(jià)格昂貴，且同位素內(nèi)標(biāo)試劑增加了日常檢測(cè)成本，設(shè)備成本高昂。

二、依利特解決方案：集成化多柱 2D-LC

方案采用樣品中心切割轉(zhuǎn)移技術(shù)，通過(guò)兩支疏水性略有差異的反相分離色譜柱和強(qiáng)陽(yáng)離子交換富集柱，在依利特2D-LC系統(tǒng)上實(shí)現(xiàn)血清樣品中的痕量氨磺必利的有效檢測(cè)。

工作流程

工作流程如下圖所示，圖中色譜泵Ａ、Ｂ、Ｃ分別輸送流動(dòng)相Ａ、Ｂ、Ｃ，利用色譜工作站實(shí)現(xiàn)系統(tǒng)自動(dòng)化分析。

1、除雜質(zhì)過(guò)程：初始條件下，進(jìn)樣后A泵工作，切換閥處于實(shí)線通路，從第一維色譜柱（1D column）上洗脫的非待測(cè)組分通過(guò)切換閥排入廢液流路。

2、富集過(guò)程：A泵繼續(xù)工作，當(dāng)待測(cè)組分開始被洗脫前，閥切換至虛線通路，使第一維色譜柱出口與富集柱（Trap column）相通；此時(shí)通過(guò)三通與第一維色譜柱出口相連的Ｂ泵流量開始增大，用以稀釋從第一維洗脫的溶劑的強(qiáng)度。

3、分析過(guò)程：樣品富集結(jié)束后，閥切換回實(shí)線通路，C泵工作，將富集柱上的待測(cè)組分洗脫至第二維色譜柱（2D column）上進(jìn)一步分離。

樣品前處理，簡(jiǎn)單至如同直接進(jìn)樣

1、加入3倍血清樣品體積的高氯酸-甲醇混合液以沉淀蛋白，渦旋2分鐘，離心5分鐘（10000r/min）后，取上清液直接進(jìn)樣。

2、支持300μL大體積進(jìn)樣，通過(guò)優(yōu)化溶劑配比，避免了大體積進(jìn)樣的溶劑效應(yīng)，大幅提升檢測(cè)靈敏度。

三柱協(xié)同，精準(zhǔn)分離

1、第一維：疏水性較弱Supersil ODS2柱，負(fù)責(zé)快速初步分離血清中的被測(cè)成分，流動(dòng)相為乙腈/磷酸緩沖液（pH3.0），快速洗脫目標(biāo)物。

2、捕集維：Supersil SCX（10 mm）強(qiáng)陽(yáng)離子交換小柱，像“過(guò)濾器”一樣精準(zhǔn)捕獲帶正電的氨磺必利，避免雜質(zhì)干擾；

3、第二維：堿性封尾、疏水性強(qiáng)的SinoChrom ODS-BP柱，專門優(yōu)化堿性物質(zhì)分離，實(shí)現(xiàn)氨磺必利與殘留雜質(zhì)的徹底分離。pH 7.0條件下，12分鐘內(nèi)完成樣品分析，如下圖所示。

不同加標(biāo)濃度的血樣分析色譜圖（氨磺必利，amisulpride）

（ａ）加標(biāo)濃度100 ng/mL；（ｂ）加標(biāo)濃度50 ng/mL

核心創(chuàng)新，接口技術(shù)提升捕集效率

傳統(tǒng)二維色譜中，樣品從第一維轉(zhuǎn)移到捕集柱時(shí)，常因有機(jī)相比例過(guò)高導(dǎo)致目標(biāo)物損失。而該系統(tǒng)通過(guò) “二維色譜接口” 設(shè)計(jì)，用輔助泵注入pH3.0的磷酸緩沖液，降低有機(jī)相比例并維持pH穩(wěn)定，確保氨磺必利始終帶正電，高效保留在捕集柱上；Kromstation色譜工作站統(tǒng)一控制所有模塊，整個(gè)分析過(guò)程通過(guò)六通閥切換流路自動(dòng)化完成，實(shí)現(xiàn)無(wú)人值守分析。

關(guān)鍵數(shù)據(jù)

1、線性范圍寬：在10~200ng/mL范圍內(nèi)，線性相關(guān)系數(shù) r=0.9998，覆蓋臨床常見(jiàn)濃度。

2、靈敏度達(dá)標(biāo)：檢出限7.28ng/mL，定量限24.27ng/mL，遠(yuǎn)低于AGNP指南推薦的100ng/mL下限。

3、 回收率穩(wěn)定：在50ng/mL和100ng/mL兩個(gè)加標(biāo)濃度下，回收率穩(wěn)定在73.7%~76.8%，重復(fù)性良好。上述數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，該方法完全滿足臨床監(jiān)測(cè)需求

臨床價(jià)值

治療藥物監(jiān)測(cè)（TDM）是實(shí)現(xiàn)“個(gè)性化給藥”的核心工具，而高效、低成本的檢測(cè)方法是其普及的前提。該多柱二維液相色譜系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)，恰好直擊臨床痛點(diǎn)：1、Kromstation色譜工作站統(tǒng)一控制所有模塊，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化分析，分析減少人為誤差，結(jié)果可靠。2、12分鐘快速檢測(cè)，適合批量樣品處理，提升臨床工作效率。3、無(wú)需復(fù)雜前處理，輕松操作。4、無(wú)需昂貴的質(zhì)譜設(shè)備，日常使用和維護(hù)成本低，適合血藥濃度樣本批量檢測(cè)。